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巨噬细胞培养

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发表于 2007-1-8 20:49:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
我要做肺泡巨噬细胞培养方面的实验,
( j- A7 E% w9 X) y0 s( ?3 |3 H可是在分离巨噬细胞时遇到了困难,7 i+ q  U2 g5 h7 y$ f2 n' e  I% u9 u
细胞在两天后全都死光光了.好心痛啊......
/ i' c8 i0 c) T* o0 D  ^' j想请做过这方面实验的兄弟帮忙指点一二!& \! v1 o; Q; g) k

6 C) U/ Q% U! h2 e) n. h 9 ~& u9 W! P7 C6 j! x+ N! p
不胜感激!
发表于 2007-1-8 20:59:21 | 显示全部楼层
 楼主| 发表于 2007-1-8 23:32:33 | 显示全部楼层
当时处死动物时,是个女生,估计是给整个动物弄到酒精里了,会不会呛到肺里?
0 R; }5 @0 r" i) p8 n5 {因为我们的巨噬细胞是从肺泡灌洗液里提取的,如果酒精呛到肺里,会不会影响?
! ^/ I- A7 z- p1 O还有,肺泡灌洗液体用的是生理盐水,离心的时候是1000g,5min,这些会不会有影响啊?
" k. z' Q" f( S0 i- j: z# Y! r6 J% N; m我也查了不少资料,说什么的都有,就是不知道改相信谁的了。' ]4 T8 j7 S6 O) g
想问问各位有做过巨噬细胞培养的大侠,交流一下,共同进步。 & I4 l4 y1 M$ ]" T" w3 d% h
发表于 2007-1-9 06:54:46 | 显示全部楼层

回复 #3 yuanfengtcm 的帖子

楼主讲的有可能,不过我没有做过这个真的还不敢给你瞎指挥,如果文献中各种做法都有的话,估计要自己摸索个条件了。
 楼主| 发表于 2007-1-9 10:55:22 | 显示全部楼层
有个病理学的教授(博士)告诉我们:巨噬细胞要三天时间才能贴壁。
* q" f" x6 N0 S4 L1 n我又怀疑是不是还没有贴壁就被冲洗掉了?但是当时明明看到有可多细胞的……
$ i9 X  K! g' I/ c  P2 y7 ]) p; j今天就培养够三天了,下午去看看,希望都能贴壁。
发表于 2007-1-10 07:40:36 | 显示全部楼层
祝愿你成功
 楼主| 发表于 2007-1-27 19:24:00 | 显示全部楼层
以前做了几次,都不成功.$ k7 H# n0 U* p0 @" V
现在细胞成长的比较好了,但是又有了新的问题了:
, I/ c4 }: z2 r9 G5 W: g# m+ d# v不能把细胞从培养瓶上消化下来了.
. @- F3 x) k1 x* T! J$ U不知道怎么回事,请各位指点.
发表于 2007-9-13 19:51:28 | 显示全部楼层
为什么不用现成的细胞系,如THP-1.
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