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巨噬细胞培养

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发表于 2007-1-8 20:49:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
我要做肺泡巨噬细胞培养方面的实验,
7 _; t6 T- ^: o4 i1 V* t9 s7 K可是在分离巨噬细胞时遇到了困难,$ g. \9 @2 D; d) s* W* O. N2 I! f0 m
细胞在两天后全都死光光了.好心痛啊....../ d4 g8 O: Z+ G. M0 d* K
想请做过这方面实验的兄弟帮忙指点一二!0 k9 i3 U$ e6 A/ X9 i2 D/ V

7 j. @1 x. k- O+ N4 i ) L( j7 x( _- M" B
不胜感激!
发表于 2007-1-8 20:59:21 | 显示全部楼层
 楼主| 发表于 2007-1-8 23:32:33 | 显示全部楼层
当时处死动物时,是个女生,估计是给整个动物弄到酒精里了,会不会呛到肺里?
  Y1 t+ v9 J0 f" i7 \& P3 X* a因为我们的巨噬细胞是从肺泡灌洗液里提取的,如果酒精呛到肺里,会不会影响?7 m' R, q0 O7 g8 c; i
还有,肺泡灌洗液体用的是生理盐水,离心的时候是1000g,5min,这些会不会有影响啊?
3 n4 l; H, W: B6 o( m我也查了不少资料,说什么的都有,就是不知道改相信谁的了。
# u6 Y* G0 q9 o' \8 {想问问各位有做过巨噬细胞培养的大侠,交流一下,共同进步。
- G* b2 a$ {+ v2 u! q# T/ c
发表于 2007-1-9 06:54:46 | 显示全部楼层

回复 #3 yuanfengtcm 的帖子

楼主讲的有可能,不过我没有做过这个真的还不敢给你瞎指挥,如果文献中各种做法都有的话,估计要自己摸索个条件了。
 楼主| 发表于 2007-1-9 10:55:22 | 显示全部楼层
有个病理学的教授(博士)告诉我们:巨噬细胞要三天时间才能贴壁。
6 z. O. \6 p4 v$ T5 B, @我又怀疑是不是还没有贴壁就被冲洗掉了?但是当时明明看到有可多细胞的……
3 a4 |3 q) ]- k- u  U! J' e今天就培养够三天了,下午去看看,希望都能贴壁。
发表于 2007-1-10 07:40:36 | 显示全部楼层
祝愿你成功
 楼主| 发表于 2007-1-27 19:24:00 | 显示全部楼层
以前做了几次,都不成功.
1 {  D( l% r6 U现在细胞成长的比较好了,但是又有了新的问题了:
1 j7 _$ ]& R' a- {9 v不能把细胞从培养瓶上消化下来了.
- T8 }  Q& i1 [8 {6 A7 i; k不知道怎么回事,请各位指点.
发表于 2007-9-13 19:51:28 | 显示全部楼层
为什么不用现成的细胞系,如THP-1.
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