大鼠阴道涂片及受孕的相关知识

aizy_cn

1.关于SD大鼠的选择
性成熟期约为8周，体重240-280g左右（雌250g，雄300g）
最适交配时间：雄鼠，90日龄，约400g
雌鼠，80日龄，约300g
8 ?/ ]( a2 ?# C理论上性成熟后交配没有问题，但是考虑到成功率的高低，建议在最适时间交配。 尤其有资料指出雌鼠的体重过轻容易影响胎鼠的质量。
: z# w* P6 k  K* ]6 @0 w, e我们实验室雌鼠体重偏轻，约200-250g，但是受孕过程也很顺利，胎鼠也没有明显异常。
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2.关于受孕前后的饲养
饲料：除常规大鼠饲料外，可添加瓜子和鸡蛋。瓜子是生的葵瓜子，不用去壳，它们很会剥；鸡蛋是白煮，老鼠尤其爱吃蛋黄。饮水中可添加维生素E。
9 Y, d9 H4 ^! n$ w; F' S9 P合笼：傍晚合笼，次晨分笼，检查是否交配。
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3.关于检查受孕与否的方式
0 @; R% A: r1 D: ?5 K1）有资料说雌鼠的阴道口随动情周期有所变化，但我想一般人难以分辨；
$ M7 D& E; s% `' A2）检查阴栓有很多人提到过，不过如果检查的时间迟了点，阴栓极有可能已脱落，反正我是一次没见到过；如果是有底铺垫料的鼠笼，估计也没人能找到脱落的阴栓。
, j/ X+ E- O. u6 f* L3）阴道涂片，我想是最实用，成功率最高的了。下面会详细介绍...
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涂片可以不用染色，基本能分辨。
1.动情间期/静止期
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5 E/ [/ K' Y# e7 j大部分为白细胞，混有少量较小的有核扁平上皮细胞


2.动情间期向动情前期发展

4 V: R  |( t! u9 u- L/ G膨大的椭圆形的有核上皮细胞逐渐出现，增多
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6 O# s  L: C7 `% d9 f3.动情前期

大部分为膨大的椭圆形有核上皮细胞
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5 w6 d& W% b' R) m' X. r9 d5 J2 ^4.动情期

膨大的上皮细胞核消失，成为鳞状脱落的角化上皮细胞，并聚堆，似落叶




6.动情后期

大部分白细胞，混有少量角化上皮细胞；
' q# l* {- l% j3 g( Z% q4 ]: K成功交配过的会看到大量精子细胞（头天下午5点合笼，次日中午12点才查的涂片，依旧能发现不少精子细胞），所以用此方法确定是否交配比较准确。


看阴道涂片的经验总结：
由于个人涂片的时间和技术不一样，老鼠的周期也不是每只都相同，而且周期之间是逐渐变化，没有明显界限，所以不容易看到典型周期的典型涂片。最好是每天做一到两次，观察变化的规律。
当白细胞的比例逐渐降低，有核上皮细胞，角化的鳞状上皮细胞越来越来多，持续2天（动情前期，动情期）接近满视野的时候，合笼多会发生交配。一旦角化的细胞变少，白细胞比例增多，说明已经开始进入动情后期，动情间期，如果没有合笼，或合笼后涂片中未发现精子，你多半只有再等待下一轮周期了。
2 W3 _6 l1 R- C有同学说如果动情间期持续3天以上，可能是已怀孕但是漏检了。我想还是蛮有道理的，不过漏掉精子并不容易。我有一次头天下午5点将其合笼，次日中午12点才查的涂片；而且那次不知什么原因笼底积水，第二天中午做涂片前我发现两大鼠还一直扒着笼沿站着，这样依旧能发现不少精子细胞，所以我想只要仔细观察，应该不会漏检掉精子.




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